皮試操作前應注意問題：
詢問有無過敏史：皮試前，要詳細詢問患者有無青霉素過敏史及是否為高敏體質，對于口述有青霉素過敏史者，應進一步詢問，是在做皮試時定性為陽性，還是用藥后出現了過敏反應。前者可給予做皮試，后者禁用。需要注意的是，有些患者為了能使用價廉的青霉素，或者對有青霉素過敏史再使用青霉素后果的認知不足而刻意隱瞞。故在詢問時要耐心細致，講明嚴重性。
皮試液的選擇：稀釋液必須采用生理鹽水。王玉芝在生理鹽水與注射用水配制的皮試液假陽性率比較中，發現前者比后者降低62.6%.張廣麗則認為為了避免個別患者發生過敏，最好不用這種稀釋液。
皮試液的使用時間：有臨床試驗顯示，在皮試液中青霉素的含量隨時間的延長及溫度的升高而下降，且青霉素存放3h后容易出現假陽性反應。故皮試液應現用現配。
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