林可霉素類的抗菌譜與大環內酯類相似，一般為抑菌劑，高濃度對敏感細菌也有殺菌作用。克林霉素的抗菌活性比林可霉素強4—8倍。其主要特點是對革蘭陽性菌或革蘭陰性厭氧菌均有強大殺菌作用，尤其對產黑素類桿菌、消化球菌、消化鏈球菌、產氣莢膜桿菌以及梭桿菌的作用更為突出。對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性鏈球菌、草綠色鏈球菌和肺炎鏈球菌等革蘭陽性需氧球菌和腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等革蘭陰性需氧球菌有顯著抗菌活性。對肺炎支原體、真菌和病毒無效。作用機制與大環內酯類相同，由于它們在細菌核糖體50s亞基上的結合點與紅霉素和氯霉素相同或相近，不宜同時使用。
林可霉素和克林霉素與大環內酯類耐藥機制相同；林可霉素和克林霉素與大環內酯類存在交叉耐藥性；大多數細菌對林可霉素和克林霉素存在完全交叉耐藥性。對紅霉素敏感的腸球菌屬和革蘭陰性需氧桿菌由于外膜通透性降低而對林可霉素類先天性耐藥。
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